内蒙古国内斑马鱼实验室

通过克隆特定基因的启动子/增强子或BAC修饰法构建在特定组织***或特定胚胎发育阶段表达报告基因的转基因品系。BAC方法如下：在斑马鱼基因组计划网站上通过BLAST将感兴趣的基因定位到已知的contig上，并通过contig信息寻找包含所选基因的BACID号；通过同源重组的方法对上述BAC克隆进行修饰，将报告基因引入原有的BAC克隆；将修饰过的BAC克隆通过显微注射的方法引入斑马鱼受精卵，连续观察并挑选具有特异表达模式的转基因鱼；将上述成鱼外交得到F1代，在F1代中筛选具有特异表达模式的成鱼，即得到所需的转基因品系。化学品斑马鱼胚胎和卵黄囊仔鱼阶段的短期毒性试。内蒙古国内斑马鱼实验室

科学家对斑马鱼视网膜能够自我修复的能力进行研究，发现其视网膜内的放射状胶质细胞能够分化成健康的视网膜细胞，从而修复受损的视网膜。

视网膜受损是造成失明的重要原因。科学家说，根据这一发现，医生将来可以采用新药品、新手术***青光眼、老年黄斑变性和因糖尿病引起各种眼疾。

利姆说，研究人员已经在实验室里成功把放射状胶质细胞分化为视网膜细胞，并大量繁殖。

研究人员在老鼠身上的移植实验已经成功。他们向患有视网膜疾病的老鼠体内移植放射状胶质细胞，这些细胞分化为健康视网膜细胞，使视网膜功能恢复。现在，他们正在研究为人类进行这项手术的可能性，并打算在5年内应用到人类身上。利姆还建议，应建立与血库类似的“细胞库”，以备患者使用。 云南分子发育与斑马鱼实验斑马鱼模型和技术研究。

斑马鱼模型现已在欧美国家广泛应用于人类疾病模型研究、新药筛选、药物毒性与安全性评价。目前国际上已有19个基于斑马鱼模型研发的药物（包括老药新用）已获得美国FDA的临床实验许可或上市许可，如PGE2、Lenaldekar、Thalidomide和Rosuvastatin等。诺华、辉瑞、罗氏、默克和阿斯利康等跨国医药巨头公司均通过自建或合作方式用斑马鱼进行药物早期研发，极大地推动了斑马鱼模型在药物研发应用中的标准化和规范化进度。由多个不同实验室进行的实验结果表明，斑马鱼模型对药物心血管毒性、发育毒性和胃肠道毒性等的评价结果与人体实验结果的一致性平均达到了80%以上（表2），按照欧洲选择性分析方法评价中心（ECVAM）的评价标准，大部分的预测准确率已达到了良好（75-85%）或***（85%）的水平。

形态特征

斑马鱼的透明性有助于原位观察其内部结构。它们的***具有与人类相同的主要特征，因此可以用来研究人类的发育过程。

斑马鱼胚胎也可以进行基因改造。斑马鱼与人类共有70%的基因，84%的疾病相关基因与斑马鱼有相似之处。。斑马鱼基因组已经完全测序，超过14万个基因已经突变，以研究它们在发育和疾病中的作用。

血肿

斑马鱼在造血研究中起着重要作用。这些鱼类具有与人类相同的连续多向造血过程，具有相同的不同谱系。因此，这个模型为科学家提供了许多关于血液谱系发育途径和血液紊乱的见解。 斑马鱼免疫系统的研究实验。

斑马鱼在基础研究领域的应用：发育生物学、基因功能研究、疾病发病机制研究等

1、斑马鱼可应用于发育生物学的细胞谱系分析、突变鉴别、饱和诱变分析、基因转移研究、基因连锁图的构建，其体外受精、胚体透明、细胞分裂快等特点使它比起大小鼠有独特优势。

2、基因功能研究：斑马鱼繁殖速度快，能提供足够量的胚胎用于基因筛选；其胚体透明的特点可以一目了然地观察到基因突变后的表型变化。

3、疾病发病机制研究：斑马鱼的***发生、疾病生理、基因组与人类相似度较大，主要信号通路和基因具高度同源性，诸多斑马鱼疾病（如血*、免疫性系统疾病、***疾病等）模型已建立，利用斑马鱼的疾病模型来研究***人类相关疾病是近年全球热点的科研项目。 使用斑马鱼实验数据申报 CFDA 临床试验。山东北大斑马鱼实验

斑马鱼应用于化学品安全和环境毒理学监测领域。内蒙古国内斑马鱼实验室

报告基因选用GFP或RFP，**小启动子来自斑马鱼gata2基因；将上述载体与体外转录得到的Tol2转座酶的mRNA共同注射到斑马鱼的单细胞受精卵中，受精卵长大后成为founder；Founder外交（out-cross）得到F1代胚胎，从中挑选出对于报告基因具有组织特异性表达模式的胚胎，拍照记录后分类培养；F1长大后通过linker-mediatedPCR的方法鉴定对应于GFP（或RFP）表达图式的Tol2插入位点，并通过与已知基因组数据比较，对插入位点进行定位与分析；通过外交纯化得到转基因鱼，直至得到只含有单个插入品系的转基因鱼。内蒙古国内斑马鱼实验室

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