新疆斑马鱼实验中心

时间:2020年09月08日 来源:

报告基因选用GFP或RFP,**小启动子来自斑马鱼gata2基因;将上述载体与体外转录得到的Tol2转座酶的mRNA共同注射到斑马鱼的单细胞受精卵中,受精卵长大后成为founder;Founder外交(out-cross)得到F1代胚胎,从中挑选出对于报告基因具有组织特异性表达模式的胚胎,拍照记录后分类培养;F1长大后通过linker-mediatedPCR的方法鉴定对应于GFP(或RFP)表达图式的Tol2插入位点,并通过与已知基因组数据比较,对插入位点进行定位与分析;通过外交纯化得到转基因鱼,直至得到只含有单个插入品系的转基因鱼。斑马鱼心血管毒性评价模型。新疆斑马鱼实验中心

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保持


首先,斑马鱼非常强壮,易于维护。由于它们是在池塘中自然发现的,它们的理想条件可以很容易地复制。


他们也很便宜;然而,它们确实需要比其他模型生物如苍蝇更多的空间。这种模式也是脊椎动物,这使它优于其他模式。


生殖


斑马鱼的繁殖力非常高,每周产数百个卵。他们也有很短的生成时间,这意味着科学家有一个永无止境的供应这种模式。这缩短了整个实验过程,并且在突变体生产中特别有用。


另一个优点是斑马鱼卵是从外部发育的,科学家可以很容易地研究它们**初的发育过程。这是一个优于其他模型,如小鼠,发展内部,因此阻碍视觉调查。 山东斑马鱼实验费用斑马鱼实验用于生物医学研究。

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斑马鱼基因突变技术服务:包括插入诱变和ENU化学诱变技术。

斑马鱼转基因资源库和突变体资源库服务:包括研制、收集和分发各种斑马鱼转基因品系和突变体

信息服务:包括建立斑马鱼资源信息网络数据库和提供斑马鱼基因组生物信息学分析服务。

转基因斑马鱼的制备主要采用两种方法:通过Tol2转座子构建组织特异性表达报告基因的方法;利用特定基因的启动子/增强子驱动报告基因在特定细胞组织中表达的方法。

首先构建以Tol2转座子为基础的enhancertrap载体,

在放大的照片中可看到耳蜗内的毛细胞

在放大的照片中可看到耳蜗内的毛细胞

通过在斑马鱼上鉴定与哺乳动物卫星细胞类似的肌干细胞群,并观察肌肉再生,可以记录体内损伤发生到修复的完整过程。这项成果由澳大利亚再生医学研究所的研究人员***发现,并将其发表于Science期刊上。这一发现可能为改善老年人和肌肉萎缩症患者的生活,甚至可以助力运动员的肌肉损伤恢复过程。


骨骼肌是一种可以借助一个能够自我更新的干细胞——肌卫星细胞来实现再生的组织,**近的体外研究已经强调了不对称分裂的重要性,但目前仍缺乏体内验证。通过在斑马鱼上鉴定与哺乳动物卫星细胞类似的肌干细胞群,并观察肌肉再生,可以记录体内损伤发生到修复的完整过程。该项分析充分揭示了卫星细胞、受伤和未受伤纤维之间复杂的相互作用,并为非对称卫星细胞分裂在自我更新和再生过程的重要作用提供了体内证据。 可作为脊椎动物模型来研究脊椎动物的胚胎发育过程。

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通过克隆特定基因的启动子/增强子或BAC修饰法构建在特定组织***或特定胚胎发育阶段表达报告基因的转基因品系。BAC方法如下:在斑马鱼基因组计划网站上通过BLAST将感兴趣的基因定位到已知的contig上,并通过contig信息寻找包含所选基因的BACID号;通过同源重组的方法对上述BAC克隆进行修饰,将报告基因引入原有的BAC克隆;将修饰过的BAC克隆通过显微注射的方法引入斑马鱼受精卵,连续观察并挑选具有特异表达模式的转基因鱼;将上述成鱼外交得到F1代,在F1代中筛选具有特异表达模式的成鱼,即得到所需的转基因品系。斑马鱼模型实验技术中心。云南斑马鱼实验文献

斑马鱼实验提高药物研发效率。新疆斑马鱼实验中心

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